CEInfinite kh?i ph? tr?c ti?p lo?i hình ?nh c?t ??y ?? ?i?n t?p trung iCIEF

CEInfinite khối phổ trực tiếp loại hình ảnh cột đầy đủ điện tập trung iCIEF

CEInfinte khối phổ trực tiếp loại hình ảnh cột đầy đủ điện tập trung iCIEF

Nền tảng coulping trực tuyến CEInfinite iCIEF-MS

Trong quá trình phát triển và sản xuất các sản phẩm sinh học protein, do sửa đổi sau dịch thuật(PTM) và suy thoái, tạo ra điện tích của protein mục tiêuKhông đồng nhấtXác. Dược phẩm sinh họccông tyDựa vào điện như mao mạch để tập trung(CIEF) và hình ảnh CIEF (iCIEF) để định lượng các đồng phân tích điện. Đặc tính đồng phân biocharge hữu ích cho nhiều giai đoạn của vòng đời, bao gồm lựa chọn dòng tế bào, nghiên cứu ổn định, công thức vàQuy trìnhkiểm soát, nhưng đặc tính này đòi hỏi phải tách protein thành một điện tích duy nhất có đủ độ tinh khiếtPhân đoạn của đồng phânĐể phân tích hạ lưu.

Ngoài ra, sự kết hợp trực tiếp của iCIEF với khối phổ kế (MS) để mô tả sẽ đơn giản hóa đáng kể quá trình mô tả.

AES đã phát triển hệ thống CIEF loại chuẩn bị CEInfinite và cột phân tách phát hiện hình ảnh toàn cột (WCID) độc quyền để tách và ghép nối iCIEF-WCID trực tuyến với MS, cho phép quan sát thời gian thực về động lực tập trung phân tách (iCIEF) và quá trình di chuyển tiếp theo của đỉnh đồng phân điện tích tách. Trong quá trình di chuyển áp suất, điện trường giữ cho các mẫu trong mao mạch tách tập trung. Các mao dẫn tách có đường kính bên trong lớn hơn, trong khi các mao dẫn truyền tải có đường kính bên trong nhỏ hơn. Do đó, sự khác biệt về đường kính bên trong này làm giảm đáng kể sự khuếch tán và tái trộn lẫn của các đồng phân protein cô lập khi chúng rời khỏi cột nhỏ.

Giới thiệu chi tiết

Điểm nổi bật của CEInfinite iCIEF-MS

• Trực tiếp kết nối iCIEF-MS với các ESI dòng chảy thấp hoặc nhạy cảm cao truyền thống của Thermo Fisher Scientific, Waters và Bruker.

• Bất kỳ bộ đệm hoặc giải pháp có thể được sử dụng như một chất bổ sung. Di cư hóa học không liên quan. Các biến thể điện tích protein được đưa vào MS theo thứ tự, tùy thuộc vào pI.
  

• CE-MS có thể được chuyển đổi trực tiếp từ bất kỳ phương pháp iCIEF hoặc CIEF nào hiện có. Độ tách tốt có thể đạt được ở cả nồng độ mẫu thấp và cao.

Phân tích iCIEF-MS mẫu NIST mAb

Hồ sơ của các đồng phân tích điện có thể được quan sát rõ ràng bởi iCIEF-UV (đỏ) và iCIEF-MS (xanh dương) và một bản đồ phổ MS tuyệt vời của tất cả các đỉnh biến thể đã thu được, cho phép chúng tôi giải tích hầu hết các biến thể tích điện NIST mAb hoàn chỉnh.

Kết quả cho thấy đỉnh cơ bản B1 và B2 chủ yếu là do sự đồng phân hóa của lysine đầu C, với trọng lượng phân tử A1 có tính axit khác biệt nhỏ so với đỉnh chính, có thể là do các sửa đổi như khử amide và cần nghiên cứu và xác nhận thêm thông qua loại chuẩn bị iCIEF.

Đánh giá từ khách hàng:

“iCIEF đóng một vai trò quan trọng trong việc theo dõi những thay đổi về điện tích trong quá trình phát triển dược phẩm sinh học. CEInfinite cho phép chúng tôi đọc khối lượng của các biến thể sản phẩm được phát hiện bởi iCIEF, giúp ích rất nhiều trong việc hiểu các tính chất hóa học của biến thể điện tích. Khi sử dụng CEInfinite kết hợp với phổ khối chính xác độ phân giải cao được cung cấp bởi hệ thống Orbitrap MS, bạn có thể có được kiến thức chi tiết về các biến thể sản phẩm và sự ổn định của sản phẩm.

Tóm lại, iCIEF-MS sử dụng CEInfinite là một công cụ đặc tính rất mạnh mẽ trong phát triển dược phẩm sinh học. "

Tiến sĩ Dan Bach Kristensen

Nhà khoa học trưởng Symphogen